蛋白质电泳试剂 40%丙烯酰胺(19: 1)
货号:A1025
规格:100ml/500ml
产品说明:
配制量1 L
配制方法:
1. 量取下列试剂,置于1 L烧杯中。
Acrylamide 380g
Bisacrylamide 20g
2. 向烧杯中加入约600 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容1 L,用0.45um滤膜滤去杂质。
4. 于棕色瓶中4℃保存。
注意:丙烯酰胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用具有积累性,配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。
聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺在加速剂N,N,N,N—四甲基乙二胺(简称TEMED)和催化剂过硫酸铵(简称AP)或核黄素(即vitamin B2)的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳
(polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE)
SDS-PAGE是在要电泳的样品中加入含有SDS和β-巯基乙醇(或者DTT)的样品处理液,SDS可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,β-巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构。SDS还与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时各种蛋白质分子本身的电荷完全被SDS掩盖。这样电泳时,就消除了各种蛋白质本身电荷及结构上的差异,电泳速度只是与蛋白质分子量有关。用本法测定蛋白质的分子量只需根据待测蛋白质在已知分子量的标准蛋白质图中的位置,就能得知分子量。
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