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                • β-淀粉酶测试盒
                产品名称:

                β-淀粉酶测试盒

                产品品牌: 索莱宝 价格:
                厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2018-03-19
                β-淀粉酶测试盒:淀粉酶负责水解淀粉,主要包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。

                产品概述

                货号BC2040规格50管/24样
                供货周期现货主要用途β-淀粉酶活性测定

                β-淀粉酶测试盒
                货号:BC2040
                规格:50管/24样
                测试方法:可见分光光度法

                 

                测定意义:
                    淀粉酶负责水解淀粉,主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。

                测定原理:
                    还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。α-淀粉酶不耐酸,β-淀粉酶不耐热。根据上述特性,钝化其中之一,就可测出另一种淀粉酶的活力。

                需自备的仪器和用品:
                    可见分光光度计、恒温水浴锅、离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

                 

                操作步骤

                一、 粗酶液提?。?br />称取约 0.1g 样本,加入 0.8mL 蒸馏水,研磨匀浆;将匀浆倒入离心管中,提取液在室温下放置提取 15min,每 5min 振荡 1 次,使其充分提??;6000g,常温离心 10min,取上清液加蒸馏水定容 10 mL,摇匀,即淀粉酶原液。
                吸取上述淀粉酶原液 1mL,加入 4mL 双蒸水,摇匀,即为淀粉酶稀释液,用于(α+β)淀粉
                酶总活力的测定。
                二、 测定步骤和操作表:
                1、分光光度计或者酶标仪预热 30min 以上,调节波长 540nm。
                2、将葡萄糖标准液稀释为 0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078 和 0.0039mg/mL 的标准溶液。
                3、按操作表依次加入各试剂:
                试剂名称
                (μL)
                α-淀粉酶活力测定  总淀粉酶活力测定  标准曲线的测定
                对照管  测定管  对照管  测定管  标准管  空白管
                淀粉酶原液  250  250  -  -  -  -
                蒸馏水  -  -  -  -  -  250
                标准溶液  -  -  -  -  250  -
                70℃水浴 15min 左右,冷却
                淀粉酶稀释液  -  -  250  250  -  -
                试剂一  -  -  -  -
                试剂二  250  250 
                在 40℃恒温水浴中准确保温 5min
                试剂一  500  500  500  500  500  500
                试剂二  250  250  250  250
                混匀,90℃水浴 10min,在 540nm 下测定吸光度,从左到右分别记为 A1、A2、A3、A4、A5
                和 A6,计算 ΔA=A2-A1,ΔA 总=A4-A3,ΔA 标准=A6-A5。
                三、 酶活性计算:
                1、标准曲线的绘制
                以 ΔA 标准为 y 轴,以标准溶液浓度为 x 轴,绘制标准曲线,得到方程 y=kx+b。将
                ΔAα 测定带入方程得到 x 1 (mg/mL),ΔA 总代入方程得到 x 2 (mg/mL)。
                2、α-淀粉酶活性
                (1)按照样本质量计算
                单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。
                α-淀粉酶活性(mg/min/g 鲜重)=x 1 ×V 样÷(W×V 样÷V 样总)÷T =2×x 1 ÷W
                (2)按照蛋白质含量计算
                单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。
                α-淀粉酶活性(mg/min/mg prot)=x 1 ×V 样÷(V 样×Cpr)÷T = 0.2×x 1 ÷Cpr
                3、总淀粉酶活性计算
                (1)按照样品质量计算
                单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。
                总淀 粉 酶 活 性 (mg/min//g 鲜 重 )=5×x 2 ×V 样÷(W×V 样 ÷V 样总) ÷T=10×x 2 ÷W
                (2)按照蛋白质含量计算
                单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。
                总淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= 5×x 2 ×V 样÷(V 样×Cpr)÷T = x 2 ÷Cpr
                4、β-淀粉酶活性计算
                (1)按照样品质量计算
                单位定义:每 g 组织在反应体系中每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。
                β-淀粉酶活性(U/g 鲜重)=淀粉酶总活性-α-淀粉酶活性=(10×x 2 ÷W)-(2×x 1 ÷W)=(10×x 2 -2×x 1 )÷W
                (2)按照蛋白质含量计算
                单位定义:每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。β-淀粉酶活性(U/mg prot)=淀粉酶总活性-α-淀粉酶活性=(x 2 ÷Cpr)-(0.2×x 1 ÷Cpr)
                5:总淀粉酶稀释倍数; V 样:加入反应体系中样本体积,0.25 mL;V 样总:提取液总体积,
                10 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W :样本质量,g;T:反应时间,5min。
                测定的吸光值大于 1 时,可以对样本进行适当稀释后测定。

                 

                β-淀粉酶测试盒订购说明:

                1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
                2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
                3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 
                4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
                5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。


                β-淀粉酶测试盒运输说明:

                1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
                2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
                3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。

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