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                • α-淀粉酶检测试剂盒
                产品名称:

                α-淀粉酶检测试剂盒

                产品品牌: 索莱宝 价格:
                厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2018-03-01
                α-淀粉酶检测试剂盒测定意义:淀粉酶负责水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。测定原理:还原糖还原3

                产品概述

                货号BC0610规格50管/24样
                供货周期现货主要用途α-淀粉酶活性检测

                α-淀粉酶检测试剂盒
                货号:BC0610
                规格:50管/24样
                测试方法:可见分光光度法

                 

                测定意义
                    淀粉酶负责水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。



                测定原理
                    还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。β-淀粉酶不耐热,在70℃钝化15min,从而测定α-淀粉酶活性。



                需自备的仪器和用品
                    可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

                操作步骤

                一、 粗酶液提?。?/strong>
                     称取约 0.1g 样本,加 0.8mL 蒸馏水匀浆;匀浆后在室温下放置提取 15min,每隔 5min 振荡 1次,使其充分提??;6000g,常温离心 10min,吸取上清液并加蒸馏水定容 10 mL,摇匀,即为淀粉酶原液。
                二、测定 步骤和加样表:
                1、分光光度计或者酶标仪预热 30min 以上,调节波长 540nm。
                2、将葡萄糖用蒸馏水稀释为 0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078 和 0.0039 mg/mL 的标准溶液。
                3、按操作表依次加入各试剂:
                试剂(μL)  对照管  测定管  标准管  空白管
                α-淀粉酶原液  250  250  -  -
                蒸馏水  -  -  -  250
                标 准 溶 液
                (mg/mL)
                -  -  250  -
                70℃水浴 15min 左右,冷却

                试剂一  500  -  -  -
                将以上对照管、测定管和试剂二置于 40℃恒温水浴中保温 10min 左右
                试剂二  250  250  250  250
                在 40℃恒温水浴中准确保温 5min
                试剂一  -  500  500  500
                混匀,90℃水浴 10min,蒸馏水调零,540nm 处读取对照管、测定管、标准管、空白管吸光度,分别记为 A 对照、A 测定、A 标准和 A 空白,计算 ΔA 测定=A 测定-A 对照,ΔA 标准=A 标准-A空白。


                三、α- 淀粉酶活性计算:
                1、标准曲线的绘制
                以 ΔA 标准为 y 轴,以标准溶液浓度为 x 轴,绘制标准曲线,得到方程 y=kx+b。将
                ΔA 测定带入方程得到 x(mg/mL)。
                2、α-淀粉酶活性的计算
                (1)按照样本质量计算
                单位定义:每g 组织每分钟催化产生1mg 还原糖定义为1 个酶活力单位。
                α- 淀粉酶活性(mg/min/g 鲜重)=x×V 样÷(W×V 样÷V 样总)÷T=2×x÷W
                (2)按照蛋白质含量计算
                单位定义:每mg 组织蛋白每分钟催化产生1mg 还原糖定义为1 个酶活性单位。
                α-淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= x×V 样÷(V 样×Cpr)÷T==0.2×x÷Cpr
                (3)血清(浆)样本中α-淀粉酶活性计算
                单位定义:每ml血清(浆)每分钟催化产生1mg 还原糖定义为1 个酶活性单位。
                α-淀粉酶活性(mg/ml)= x÷T=0.2×x
                V 样:加入反应体系中样本体积,0.25 mL;V 样总:提取液总体积,10 mL;Cpr:样本蛋白
                质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,5min。

                 

                注意事项:
                当测定的吸光值大于 1 时,可以对样本进行适当稀释后测定。

                 

                α-淀粉酶检测试剂盒订购说明:

                1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
                2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
                3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 
                4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
                5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。

                 

                α-淀粉酶检测试剂盒运输说明:

                1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
                2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
                3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。

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