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                • 二胺氧化酶测试盒
                产品名称:

                二胺氧化酶测试盒

                产品品牌: 索莱宝 价格:
                厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-03-07
                二胺氧化酶测试盒:DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。

                产品概述

                品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC1285
                规格100管/48样供货周期现货
                主要用途二胺氧化酶活性测定

                二胺氧化酶测试盒 微量法

                注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

                货号:BC1285

                规格:100T/48S

                 

                产品内容:

                提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。

                试剂一:液体 0.25mL×1 支,4℃保存。

                试剂二:液体 2mL×1 管,4℃保存。

                试剂三:液体 1mL×1 管,4℃保存。

                 

                产品说明:

                    DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。

                    DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻

                联茴香胺生成氧化型邻联茴香胺,在460nm处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率,计算DAO活性。

                 

                自备实验用品及仪器:

                    天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。

                 

                操作步骤:

                一、粗酶液提?。?/span>

                1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心20min,取上清,置冰上待测。

                2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

                3. 血清等液体:直接测定。

                 

                二、测定操作表:

                1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长460nm,蒸馏水调零。

                2、操作表

                 

                对照管

                测定管

                粗酶液(μL

                50

                50

                提取液(μL

                128

                108

                试剂一(μL

                2

                2

                试剂二(μL

                20

                20

                试剂三(μL

                 

                20

                混匀,37℃水浴30min,微量石英比色皿/96孔板,蒸馏水调零,测定460nm吸光值。ΔA=A测定-A 对照

                 

                三、酶活性计算公式:

                a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

                1)按样本蛋白浓度计算:

                     酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。

                    DAO 活性(nmol/min/mg prot=A460÷ε×d×V 反总÷V ×Cpr÷T= 18×A 460 ÷Cpr

                2)按样本质量计算:

                    酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

                     DAO 活性(nmol/min/g=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷V 样总×W÷T= 18×A 460 ÷W

                3)按细胞数量计算:

                     酶活性定义: pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

                DAO 活性(nmol/min/104cell=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷V 样总×细胞数量)÷T= 18×A460 ÷细胞数量

                 (4) 按液体体积计算

                     酶活性定义: pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

                    DAO 活性(nmol/min/mL=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷T= 18×A460

                    ε:氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,0.2mL;V 样:反应中样本体积,0.05mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;Cpr

                    样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,30min

                b.  96 孔板测定的计算公式如下

                1)按样本蛋白浓度计算:

                    酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。

                    DAO 活性(nmol/min/mg prot=A460÷ε×d×V 反总÷V ×Cpr÷T= 36×A 460 ÷Cpr

                2)按样本质量计算:

                     酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

                    DAO 活性(nmol/min/g=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷V 样总×W÷T= 36×A460÷W

                3)按细胞数量计算:

                      酶活性定义: pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

                DAO 活性(nmol/min/104cell=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷V 样总×细胞数量)÷T   = 36×A460÷细胞数量

                (4) 按液体体积计算

                     酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

                    DAO 活性(nmol/min/mL=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷T= 36×A460

                    ε :氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L /mmol/cm;d96 孔板光径,0.5cm;V 反总:

                    反应总体积,0.2mL;V 样:反应中样本体积,0.05mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,30min

                 

                注意事项:

                 1、如果OD值小于0.01,适当加大提取用样本量;OD值大于0.8,粗酶液可适当稀释,或者减少提取用样本量。

                    2、样品蛋白质含量需要另外测定。

                 

                二胺氧化酶测试盒订购说明:

                1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
                2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
                3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 
                4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
                5、请办理完货款后,将底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。


                运输说明:

                极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
                低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
                常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。

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